免疫定量分析平臺
高通量FACS
流式細胞儀(flow cytometer)又稱熒光激活細胞分選器(FACS,Fluorescence Activated Cell Sorter),是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段,它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好等優點,成為當代最先進的細胞定量分析技術。
美國BD公司推出的FACS Array生物分析儀。這一儀器光學系統配置了532nm綠色激光器和635nm紅色激光器,可以檢測2個散色光信號和4個熒光參數。由于整合了96孔板上樣技術和數字化電子系統,使得樣本采集的速度達到15000個/秒,尤其適用于高通量篩選,比如快速的、高通量的信號檢測和細胞分析。
這一儀器由檢測分析儀、電腦工作站、系統軟件和CBA軟件組成,具有自動化程度高,速度快,靈敏度高等特點,其速度可將處理一塊96孔板所需時間減少至35分鐘,而且其靈敏度和動力學范圍保證了2.5um-50um的微球檢測,散射光信號可以清晰分辨淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞。
多光譜FACS
光譜流式細胞術是一種基于常規流式細胞術的技術,其中光譜儀和多通道檢測器(通常為CCD)代替了常規系統中的傳統反射鏡,濾光器和光電倍增管(PMT)。主要用于識別高自發熒光或關鍵生物標志物表達水平低的細胞群。
Cytek是光譜流式細胞儀主要代表品牌,是全球唯一能實現一管樣本40色以上檢測分析的流式細胞儀,成為高端多色流式領域的唯一選擇。以Cytek為代表的全光譜流式細胞儀使用CWDM技術來分光,從應用PMT技術提升為雪崩光電二極管(Avalanche photodiode,APD)芯片技術來完成光電轉換。通過引入光通訊領域的光信號處理技術,Cytek流式細胞儀能夠采集全光譜信號,利用強大的軟件算法,對高維數據進行降維或聚類分析,從根本上避免了熒光光譜重疊所導致的補償問題,可以提供20-50色多參數分析。
多色免疫熒光
單色免疫熒光得到的往往是孤立的成果,而多色分析可以了解細胞之間的相關性。Beckman公司的CytoFLEX平臺流式細胞儀在六種激發波長(355 nm、375 nm、405 nm、488 nm、638 nm、808 nm)下表現出很好的靈敏度和重現性。CytoFLEX是市場上唯一能夠檢測80nm聚苯乙烯珠粒的細胞儀。可用于分離和分析血液或培養細胞、細菌、藻類、酵母、微粒,甚至像細胞外囊泡這樣的納米顆粒。
CytoFLEX LX流式細胞儀是CytoFLEX平臺的延伸產品。此型號采用多達6個激光和21個顏色參數擴展研究的可能性。六個空間分離的激光可以讓面板在整個光譜中擴散,減少串擾和光譜重疊。目前有兩個系列可用,即紫外線-紫-藍-黃綠-紅-紅外線(U-V-B-Y-R-I)系列和近紫外線-紫-藍-黃綠-紅-紅外線(U-V-B-Y-R-I)系列。
Luminex
目前運用Luminex xMAP技術進行臨床診斷和基礎研究成為生命科學研究領域的一大熱點,Luminex系統可以全面進行各種single plex或multiplex多形式的細胞因子檢測和生物標志物檢測。Luminex 200系統主要用于體外檢測,該系統專門用于進行多種基于xMAP技術的實驗室測試,檢測xMAP微球表面的生物分子反應,可以同時對單個測試樣本中的多達100個分析物進行分析。
Luminex 200生物分析技術平臺結合了磁珠/非磁珠多重反應體系、分析軟件、技術支持,可提供一個完整的快速、精確的生物標記定量平臺。該系統由激光系統、光學系統、液流系統、液流控制系統以及先進的數字處理系統和高通量XY平臺組成,提供一整套先進的、完整的液相芯片檢測平臺。它應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區分500種不同的微